PCR是聚合酶鏈式反應的縮寫,它是利用DNA聚合酶在短時間內將目標DNA序列從一個拷貝擴增到數百萬個拷貝的一種方法。具體而言,將下述1~3的一系列反應稱為“循環",通過重復25~35個循環,以指數方式合成目標DNA的拷貝。
變性:加熱雙鏈DNA模板以分離DNA鏈
退火:將稱為引物的短 DNA 分子附著到目標 DNA 的相鄰區域
延伸:DNA 聚合酶合成模板的互補鏈,從每個引物開始并向 3' 端移動。
熱循環儀是一種用于自動控制 PCR 中溫度循環和孵育時間的設備。PCR 管專為熱循環儀而制造。為了選擇正確的 PCR 管,有必要了解您所使用的熱循環儀的規格。
此外,PCR有標準PCR、梯度PCR、實時PCR、qPCR等多種類型,因此需要根據目的選擇合適的PCR。同時,根據實驗類型適當準備實驗設備和試劑也很重要。
通常使用的材料是聚丙烯。這是因為聚丙烯具有化學惰性,可以承受熱循環過程中溫度的快速變化。此外,管壁制造得薄而均勻,以增強熱循環儀的傳熱。
此外,我們還非常謹慎地確保我們的產品不含灰塵、核酸內切酶、熱原、DNA、潤滑劑、染料、重金屬、填料和其他雜質。這是因為,如果產品在制造過程中受到污染,灰塵顆??赡軙埩舨⒁种芇CR,或者DNA片段可能作為非特異性擴增的模板,從而降低實驗準確性。
該結構由容納樣品的管部分和蓋部分組成。有一根管分開的單管型,也有多管連接的8管型和12管型。
瓶蓋形狀有平頂和圓頂兩種,又可分為兩種類型:一瓶蓋連接一根管子,以及多瓶蓋與管子連接和分離的類型。
管件有兩種類型:一種是正常高度(標準輪廓),一種是低高度(低輪廓)。除了透明透明型外,還有白色型。
根據實驗類型選擇熱循環儀并使用與您所使用的熱循環儀兼容的熱循環儀非常重要。例如,透明管(透明型)可以很容易檢查內容物,但白色管具有防止熒光折射和擴散到管外的作用,增加qPCR的靈敏度。
圓頂蓋可以快速傳遞熱循環儀的熱量,而平蓋的優點是易于用記號筆標記,并且在采集樣品時易于用針刺穿。
薄型管的高度較低,最大限度地減少了反應容器內的空間面積,從而減少了蒸發的影響,并且比普通管具有更高的導熱率。薄型管有時被稱為快速管,因為它們與快速熱塊兼容。
另外,PCR管適用于中小型PCR實驗,因此如果規模較大,則適合使用PCR板。
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